阅读次数：1608 发布时间：2015/5/8 9:06:57
根据用途、成分、状态、用途等不同方面，培养基的分类也是不同的。而不同类型培养基，其用途及优缺点有有所不同。据上海恒远生物高品质培养基供应中心了解，原来可以通过这几种方法评估培养基性能……
一、理化指标
理化指标包括培养基的色泽，培养基的水分含量，培养基的澄清度，培养基的PH,固体培养基的凝胶程度。通常由生产厂商通过对原材料、生产工艺、生产过程进行质控，使用者通常用感官检查或pH测定进行确认。
二、微生物学指标
培养基对目标菌的促生长能力(生长率)，培养基对非目标菌的抑制能力(选择性)，培养基的指示能力(生化特性)。
微生物学评估方法-使用一套合适的质控菌株进行测试
1.定量法—培养基生产厂家或对培养基质量有特殊要求的实验室对培养基质控；
2.半定量法—实验室对培养基的质控；
3.定性法—实验室对培养基的质控。
三、固体培养基的生长率测试-定量法
选择合适稀释度的质控菌悬液(目标菌)0.1mL，均匀涂布接种于待测平板和参比平板。每一稀释度接种两个平板。并按标准规定的培养条件培养平板。
计算生长率PR：
PR=NS/N0
PR：生长率。
NS：待测培养基平板上得到的菌落总数。
N0：参比培养基平板上获得的菌落总数(该菌落总数应≥100CFU)。
四、质控菌株的要求
1.具典型反应特性的生长良好的阳性菌株；
2.弱阳性菌株(对培养基中选择剂等试剂敏感性强的菌株)；
3.不具有该特性的阴性菌株；
4.部分或完全受抑制的菌株。
五、固体培养基的生长率测试半定量法
将质控菌株接种到非选择性肉汤培养过夜。
用1ul接种环按图划线接种：
计算生长指数G：
每条有比较稠密菌落生长的划线则G为1，每个培养皿上G最大为16。
如果仅一半的线有菌落生长，则G为0.5。
如果划线上没有菌落生长或生长量少于划线的一半，则G为0。
记录每个平板的得分总和便得到G。
六、固体培养基的生长率测试-定性法
将质控菌株接种到非选择性肉汤培养过夜。
用1ul接种环取测试菌培养物在测试培养基表面划平行直线(细菌)，或用接种针直接挑取斜面培养物点种接种(霉菌)。并按标准规定的培养条件培养平板。
培养后按以下方法对培养基计分：
0 表示无生长；
1 表示微弱生长；
2 表示生长良好。
七、固体培养基生长率评价标准
非选择性固体培养基和固体计数培养基PR值应不小于0.7；G值应大于6。
选择性固体培养基PR值一般应不小于0.5，最低应为0.1 。
选择性计数固体培养基上目标菌的生长率一般不小于0.7 。
定性法目标菌得分应为2。
固体培养基选择性测试-半定量法
将质控菌株接种到非选择性肉汤培养过夜。
用1μl接种环取选择性测试工作菌悬液1环，在待测培养基表面划六条平行直线，同时接种两个平板，划线时可在培养基下面放一个模板图，按标准规定的培养条件培养平板。
八、固体培养基选择性测试-半定量法
计算G：
每条有比较稠密菌落生长的划线则G为1，每个培养皿上最多为6分。
如果仅一半的线有菌落生长，则G为0.5。
如果划线上没有菌落生长或生长量少于划线的一半，则G为0。
评价标准：
G应小于6。
九、固体培养基生化特性测试-定性法
分别观察质控菌株(包括目标菌和非目标菌)在培养基上形态、颜色及生化特征。
评价培养基的指示系统是否正常。
液体培养基测试-半定量法
混合菌接种：在待测液体培养基中接种10~100CFU目标菌，同时接种1000~5000CFU非目标菌，按标准规定条件培养。
非目标菌接种：在待测液体培养基中分别接种上述非目标菌，按标准规定条件培养。
用10μL接种环取1环混合菌接种培养物，划线接种于特定的选择性平板上，按标准规定条件培养。
吸取非目标菌接种培养物10μL，以涂布法或倾注法接种于非选择性平板上(如TSA)，按标准规定条件培养。
十、评价标准
1.目标菌在选择性平板上的菌落应>10CFU，则生长率良好。
2.非目标菌在非选择性平板上菌落数应<100CFU，则表示待测培养基选择性良好。
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