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要完成一项漂亮的ELISA实验,不光要做足实验的准备,还要熟练掌握操作方法及技巧,最后就是实验的结果了。那么ELISA试剂盒实验的结果如何判断分析呢?
1.仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2.以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IFN-Y标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IFN-Y含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3.检测值范围:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml
ELISA的试验结果可用肉眼观察颜色反应的深浅作出判断,也可用分光光度计作精确测定。当然,后者更为正确。而肉眼观察更为简便,而且也有一定正确性。据Adler(1980)报告,目测为±1+、2+、3+、4+相当于分光光度计测定O.D值。
不论用哪种方法判定结果,每次都要有阳性和阴性参考血清作对照,这样可以消除一些外界的影响因素。
≤0.04“±” 0.06~0.092和0.08~0.25“+”
0.26~0.5“++” 0.51~1.0“+++” > 1.0“++++”
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