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ELISA常用的四种方法
1.直接法测定抗原
将抗原吸附在载体表面;
加酶标抗体,形成抗原—抗体复合物;
加底物。底物的降解量=抗原量。
2.间接法测定抗体
将抗原吸附于固相载体表面;
加抗体, 形成抗原-抗体复合物;
加酶标抗体;
加底物。测定底物的降解量=抗体量。
3.双抗体夹心法测定抗原
将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗体复合物;
加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;
加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);
加底物。底物的降解量=抗原量。
4.竞争法测定抗原
将抗体吸附在固相载体表面;
加入酶标抗原;
加入酶标抗原和待测抗原;
加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差=未知抗原量。
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