技术服务专区
酶联免疫(ELISA)代测服务
ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的..
组织形态学实验技术服务
组织包埋,切片,免疫组化,免疫荧光,偏振光,原位杂交,凋亡,常规染色,特殊染色,组织形态图..
Western Blot实验技术服务
Western Blot是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳分离开,再利用电场力的作..
解决方案

实验中常用抗凝剂的配置使用方法解析

阅读次数:748    发布时间:2016/5/18 11:03:14

根据上海恒远生物多年的临床研究经验总结。在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素 

(1)肝素抗凝作用原理

肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。

(2)配制和用量

纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg/kg体质量,狗5~10mg/kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。

二、草酸盐合剂 

(1)原理

草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

(2)配制方法及用量

草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。

(3)注意事项

草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。

三、枸櫞酸钠

常配成3~5%水溶液。也可直接加粉剂,每毫升血加3~5mg,即可达到抗凝目的。

枸櫞酸钠可使钙失去活性,防止凝血。但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5~6%溶液。

四、草酸钾

(一)原理和注意事项

草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性,故应注意。

(二)配制及使用方法

取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。配制成10%水溶液,如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2%溶液,如每管加0.1ml可使1~2ml血液不凝。

五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)

EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg可抗凝1ml血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝。

原创作者:上海恒远生物科技有限公司

品质保证

防伪易碎商标贴,四招助您分辨真假。

送货保障

产品均有现货,多家快递公司合作准时到达。

售后服务

产品及实验问题,提供技术支持保障。

  • 电话:18221656311
  • 手机:18221656311
  • 联系人:钱经理

上海恒远免疫学第三方检测中心

微信扫描二维码,参与上海恒远活动,

劲爆优惠触手可得!

主营产品:

酶联免疫试剂盒,酶联免疫实验代测,elisa试剂盒,原装elisa试剂盒,elisa检测试剂盒,进口血清

公司名称:上海恒远生物科技有限公司 公司地址:上海市松江临港科技城汉桥文化科技园B座 邮政编码:201615 邮箱:2885617636@qq.com

联系人:钱经理 联系电话:18221656311 ICP备案号: 沪ICP备11004148号-22 技术支持:阿仪网

娇娇

小李

小强

小李

小钱