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科研界的大佬:血清正确保存

阅读次数:885    发布时间:2018/10/29 15:33:43

    血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。那如何正确的保存血清呢?    

正确保存方法
    1.生物学实验中需求长时间保存的血清有必要储存于-20℃至-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超越1个月。因为血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留必定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

    2.热灭活是指56℃,30分钟加热已完全冻住的血清。生物学实验中加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非有必要,一般不主张作此热处理,因为热处理会构成血清堆积物显着增多,并且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,滑润肌细胞缩短,肥大细胞和血小板开释组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

    3.瓶装血清冻住需采用逐步冻住法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待悉数溶解后再分装。生物学实验中在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(当心勿构成气泡),使温度与成分均一,减少堆积的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻住,这样因温度改动太大,简略构成蛋白质凝集而呈现堆积。

    4.一般厂商供给的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清参与培养液内一同过滤,切勿直接过滤血清。

    5.血清中的堆积物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻住后血清中纤维蛋白构成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,堆积物的构成会显着增多。有些堆积物在显微镜下调查象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但假设怀疑血清质量,则应当即停止使用,替换另一批号的血清。

    6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,一同血清中的有效成分会破会而影响血清质量。 
        

避免产生沉淀物
    1.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。

    2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生

    3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。

    4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

    5.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

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原创作者:上海恒远生物科技有限公司

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