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IC50值您是个神马?

阅读次数:1684    发布时间:2019/10/14 10:57:17

        IC50值是个什么?您是否一头雾水呢?不知道没有关系,小编带着您一起来看看,这篇干货很实用哦,记得收藏起来哦,话不多说,请看吧!

IC50值概念
        IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一药物或者物质(抑制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对药物的耐受程度。

基本信息
中文名称:半抑制浓度
外文名称:IC50
英文全称:50% inhibitory concentration 
类别:浓度
反应:酶催化反应

关于IC50值计算方法
        IC50和EC50的计算一般需要测定5个以上的点,再通过曲线拟合得到函数计算而得,或者假设IC50(EC50)附近的点连成直线计算而得等,但这都存在较大的误差。因为拟合的函数曲线并不能保证都通过所测定的点,其次IC50(EC50)附近的点并不都连成直线,所以计算误差较大。IC50(EC50)计算软件解决了以上问题。本软件输入可以为多组试验数据,软件将自动取最靠近IC50(EC50)处的三个点进行二次曲线拟合,所建立的函数能完全通过IC50(EC50)附近的3个点,决定系数R2=1.00,并自动生成曲线图、曲线方程和IC50(EC50)值。支持曲线图的复制、粘贴及图上上文字的编辑。在保证试验数据精度的前提下可以确保在IC50(EC50)周围的曲线的高精度,由此算得的IC50(EC50)可以保证是高精度的,使用效果很好。

半抑制率

        半抑制浓度(或称半抑制率),即IC50。在间接竞争ELISA标准曲线中是一个非常重要的数据,标准曲线是一个S型曲线。

        ICELISA中,不添加抑制物质的对照孔的OD值为B0, 添加了抑制物质的孔的OD值为B。

        B/B0% 就叫做结合率, 在结合率为50%时所对应的抑制物质的浓度就叫做IC50。

        一般IC50的数值越小,说明你的抗体的特异性能越强!

        最小检测限为试剂盒标准曲线的最小的浓度,小于最小浓度或大于最大浓度,即不在曲线范围内的都不准确,大于最大浓度可以稀释后测。

        IC50为50%抑制浓度即B/B0=50%时所对应的浓度,半数抑制是用来衡量抗体灵敏度,半数抑制越低,说明抗体的灵敏度越高。

        通常来说,试剂盒最大和最小量程应该是该抗体用来检测标准品的检测限,检测限分最大和最小检测限。

        检测下限一般为理论值,是根据标准曲线算出来的理论上可以检测到的最小的值;

        定量限为实际检测时可以定量的最低的值;

        而最大检测限就是实际操作中抑制率达到100%时的药物浓度。

        检测下限(LOD)对应的OD值:OD(LOD) =B0-3SD

        定量限(LOQ)对应的OD值:OD(LOQ) = B0-10SD

浓度
        如果只是IC50,一个底物浓度就够了。但是IC50会随底物浓度的变化而变化,所以你要指定一个底物的浓度,发表IC50的时候要注明你底物的浓度。这个浓度如果没有任何依据的随意指定一个,感觉上就会不专业。如果你已经有其它人关于这个酶和其它抑制剂的资料(并且上面详细注明了所用的酶和底物的浓度,还有对底物的Km),你当然可以省事的在其它人的底物浓度下测你的IC50。不过如果你没有详细的相关资料或者不很肯定查到的相关数据,最好是先自己做一下这个酶的动力学曲线。具体怎么做动力学找本书上就有了。简单的就是根据相关资料(新的酶就要看自己的感觉了)设计几个底物浓度,然后调整加的酶的浓度使得所有速度曲线在引发后的几分钟都是线性的,而且前几分钟消耗的底物量一定不要超过底物总浓度的10%。底物的浓度你要高高低低地试几次,然后估算出Km的大致值(加许多底物让酶饱和,这个时候测出的速度应该是Vmax, Km就是使得速度为Vmax一半的时候的底物浓度)。然后你设计10~15个底物浓度点上及5倍Km,下及1/5Km,注意Km附近点要密集些因为正是曲线的拐弯处。情况好的话你就会拿到那个酶的Michaelis-Menten曲线(X轴底物浓度Y轴速度),处理后得到Km和Kcat。我觉得最后指定的测IC50的底物浓度要么是Km,要么是3xKm或5xKm(饱和)。
        恒远具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有最有竞争力的价格。公司目前可以提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类上万种产品。可接ELISA实验,IC50实验,WB实验等,更多精彩欢迎来电咨询!

原创作者:上海恒远生物科技有限公司

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