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ELISA实验样本处理的注意事项

阅读次数:41    发布时间:2024/6/4 9:53:13

    ELISA试剂盒检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或安排匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理办法是不一样的。试验样本的处理可谓是ELISA试验的关键过程之一,所以科研朋友一定要多加注意。下面就给大家详细说说!


    一、均质   
    ①安排样本:肉、肝食品类切细,用绞肉机重复绞碎,混合均匀。    
    ②水产样本:去除样品的非食用部分,食用部分切细,用均质器均浆;质料外表较脏时,需适当用蒸馏水清洗。
    ③蛋类:鲜蛋去壳,蛋黄和蛋白充沛混匀。    
    ④水果、蔬菜类:先用水洗去泥沙,然后除去外表的水分,取食用部分。

    二、振动提取    
    将提取溶剂参加到装有样品的具塞容器中,振动,使提取溶剂与容器内的样品充沛触摸以深入到样本安排内部,提取待测组分。
    ①振动办法:振动器上进行上下、往复式振动、手摇式上下振动。    
    ②在安排样本中参加有机溶剂之间提取时,ELISA试剂盒应边加边振动,防止安排凝结成团,不利于提取。

    三、乳化现象
    在用有机溶剂提取过程中,假如呈现乳化现象,处理的办法有:    
    ①用细头轻轻的拌和,损坏乳化后,再重复离心。    
    ②再参加适量的提取剂,重新振动。注意离心后要确保样本的稀释倍数不变。

    四、浓缩
    因为净化过程中引进的溶剂,可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接剖析,需要去除全部有机溶剂。即试剂盒前处理过程中把样本在60℃氮气下吹干,再用复溶液溶解枯燥残留物。

    浓缩办法:氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。    
    请注意:
    ①在吹干样本之前,用甲醇清洗针头,防止杂质搅扰。    
    ②在吹样本时,针头应在液面上空,防止与样本触摸,防止发生交叉污染。    
    ③样本吹干后应立即取下,防止吹的时刻过长,影响zui终检测结果。    
    ④不同的药物,吹干后样本的保质期不同,ELISA试剂盒提倡待样本回到室温后立即复溶。

    五、净化
    经过提取的待测组分中一般含有一些会搅扰试剂盒中抗原抗体反响的杂质或者是含有与待测物结构相似的杂质。将待测组分与杂质别离的过程,咱们称为试剂盒中样本的净化。在咱们现有的试剂盒前处理办法中涉及到常见的净化是:液液分配法。比方:用复溶液溶解枯燥残留物之前先参加适量的正己烷,在参加正己烷和复溶液涡动后假如呈现乳化现象,能够60℃水浴加热,至乳化现象消失或削弱后,加大离心转速进行离心。

原创作者:上海恒远生物科技有限公司

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