技术服务专区
酶联免疫(ELISA)代测服务
ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的..
组织形态学实验技术服务
组织包埋,切片,免疫组化,免疫荧光,偏振光,原位杂交,凋亡,常规染色,特殊染色,组织形态图..
Western Blot实验技术服务
Western Blot是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳分离开,再利用电场力的作..
解决方案

ELISA实验标本该如何处理?

阅读次数:526    发布时间:2022/11/8 10:25:38

ELISA试剂盒标本处理复杂多样,一不小心没处理好可能会导致实验的数据偏差。那到底怎么处理才算是比较合理的呢?恒远生物为您总结一份ELISA实验标本处理攻略,请收好啦!
 
一、血清的采集、处理和保存
1.真空采血针采集2ml 新鲜血液,加入无菌试管中。
2.采血后室温静置1小时。
3.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
5.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染,因为菌体中可能含有含有内源性过氧化物酶,也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜时检测。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。
 
二、血浆的采集、处理和保存
1.真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。
2.按1:9加入抗凝剂(EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠),30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集)。
3.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5 min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
5.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。请注意指标说明书上对于抗凝血剂是否有特殊要求,建议使用 EDTA。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。注意事项:制备血浆标本需借助于抗凝剂EDTA, 抗凝不完全的标本因纤维蛋白原干扰而造成假阳性。
 
三、尿液的采集、处理和保存
1.采集尿液样本500ul加入无菌试管中。
2.将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10 min,将离心好的样本留上清,弃下面沉淀。 
3.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存 1 个月;-70℃下,可放置保存6个月。
4.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。
 
四、细胞上清液的采集、处理和保存
1.采集细胞培养上清液500ul,加入无菌试管中。
2.将采集血液用离心机 4℃,2500rpm 离心 10 min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。 
3、取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
4.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。
 
五、各类组织匀浆的采集、处理和保存
1.采集组织,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,剔除附属的结缔组 织,称取组织块。
2.用移液管量取0.1M PBS或者用0.86%冷生理盐水,匀浆介质或生理盐水的体积总量应 该是组织块重量的9倍,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中)。
3.匀浆的方式有多种: 
a) 手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。 
b) 机器匀浆:用组织捣碎机 10000~15000r/min 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用 内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5 次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
4.将制备好的10%匀浆用离心机4℃,3000rpm离心15min,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
5.取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。
6.根据您的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。 
 
上海恒远生物科技有限公司专业供应高品质人ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、豚鼠ELISA试剂盒、兔ELISA试剂盒、牛ELISA试剂盒等各种ELISA试剂盒及生物试剂、培养基、标准品、对照品、血清等试验耗材!我司备有专业的技术研发团队,长期致力于ELISA试剂盒的研发与销售,实验提供免费代测服务,并提供精湛的技术服务,欢迎来电咨询!

 

原创作者:上海恒远生物科技有限公司

品质保证

防伪易碎商标贴,四招助您分辨真假。

送货保障

产品均有现货,多家快递公司合作准时到达。

售后服务

产品及实验问题,提供技术支持保障。

  • 电话:18221656311
  • 手机:18221656311
  • 联系人:钱经理

上海恒远免疫学第三方检测中心

微信扫描二维码,参与上海恒远活动,

劲爆优惠触手可得!

主营产品:

酶联免疫试剂盒,酶联免疫实验代测,elisa试剂盒,原装elisa试剂盒,elisa检测试剂盒,进口血清

公司名称:上海恒远生物科技有限公司 公司地址:上海市松江临港科技城汉桥文化科技园B座 邮政编码:201615 邮箱:2885617636@qq.com

联系人:钱经理 联系电话:18221656311 ICP备案号: 沪ICP备11004148号-22 技术支持:阿仪网

娇娇

小李

小强

小李

小钱